Obsah
V tomto článku: Přímé pozorování bakteriíMasná biomasaPostup pomocí turbidimetry8 Reference
Existuje několik způsobů, jak měřit bakteriální růst, a některé jsou obtížnější než jiné implementovat. Nejjednodušší se běžně používají a dávají relativně přesné výsledky, pokud jsou během měření přísné. Nejběžnějšími postupy jsou pozorování a počítání bakterií, měření biomasy a suché biomasy a turbidimetrie. Vaše školní laboratoř by měla mít vybavení potřebné pro alespoň jednu z těchto metod.
stupně
Metoda 1 Pozorujte bakterie přímo
-
Připravte zařízení. Kromě toho, co se obvykle vyskytuje ve všech biologických laboratořích, budete potřebovat i některé konkrétní položky. Ujistěte se, že máte všechny nástroje a nádoby po ruce, takže nemusíte chodit tam a zpět ve skříni, kde je zařízení uloženo. Přemýšlejte o tom, co budete dělat, abyste věděli, co budete v každé fázi používat. Budete také muset znát některé klíčové pojmy.- Získejte hemacytometr. Je to čepel s komorami číslování, která je spojena s mikroskopem. Je to velmi jednoduchý nástroj pro nastavení a používání. Najdete je od dodavatelů specializujících se na vybavení pro školy a výzkumné laboratoře. Obvykle je k dispozici uživatelská příručka.
- Vezměte si Petriho misku. Toto je malý, kulatý, mělký kontejner, kde můžete pozorovat bakterie.
- Termín „kultura“ označuje mikroorganismus, který je uměle propagován jako součást vědeckého experimentu.
- „Bujón kultury“ je médium, ve kterém se bude kultura rozvíjet.
-
Použijte Petriho misku. Vložte bakterie do krabice a pozorujte je pod mikroskopem. Můžete jej také umístit přímo na snímek. Pak spočítejte počet přítomných bakteriálních buněk. -
Ujistěte se, že máte správnou koncentraci. Pokud je příliš mnoho bakterií, překrývají se a nebudete je moci správně spočítat. Pokud se jedná o tento případ, zřeďte kulturu smícháním s malým vývarem. Pokud je jich příliš málo, nebude výsledek významný. Poté musíte filtrovat vývar, abyste zvýšili koncentraci. -
Počítejte bakterie. Posledním krokem je jednoduše spočítat. Podívejte se na počet komor pod mikroskopem a poznamenejte si počet buněk, které vidíte. Porovnejte výsledek s jinými podobnými zkušenostmi.
Metoda 2 Měření biomasy
-
Zkontrolujte, zda máte potřebné nástroje. Implementace této metody je pomalá a vyžaduje použití drahého vybavení. Pokud ji neumýváte, použijte jinou techniku. Na druhé straně, pokud máte v laboratoři správné nástroje, je měření biomasy a suché hmoty ideální, protože poskytuje přesné výsledky. Potřebujete:- hydraulická trouba s nuceným prouděním,
- hliníková vážicí pánev,
- několik Erlenmeyerových baněk,
- odstředivka nebo laboratorní filtrační systém.
-
Zkontrolujte, zda je plodina v Erlenmeyerově baňce. Pokud tomu tak není, nalijte ji. V této fázi experimentu jsou bakterie stále v kultivačním bujónu. Budou odděleny později. -
Vysušte vážicí misku. Za tímto účelem jej vložte do trouby. Můžete také použít membránový filtr z acetátu celulózy o průměru 47 mm s póry 0,45 μm. Ať už je použit jakýkoli nástroj, změřte jeho hmotnost přesně tak, aby mohla být odečtena od výsledků, které získáte, když je na ni položena plodina. -
Mix. Promíchejte lerlenmeyerovou vrstvu, aby byla kultura homogenní. Opravdu, kvůli gravitaci, buňky přirozeně inklinují k pádu ke dnu nádoby. Musíte tedy trochu zatřást, pro které jsou distribuovány jednotným způsobem a že váš vzorek je reprezentativnější. -
Odstředivka. Pomocí odstředivky oddělte bakterie od kultivačního média. Toto zařízení se používá k otáčení nádoby a protizávaží velmi vysokou rychlostí. Vývar proudí, který udržuje pouze živou hmotu. Pro více informací najdete informace o tom, jak používat odstředivku na internetu. -
Získejte těsto. Položte jej na vážicí misku. Můžete házet kultivační vývar, už ho nebudete potřebovat, ale udržujte lerlenmeyer po ruce. -
Opláchněte odstředivku. Vypláchněte oplachovací vodu na vážicí misku kromě bakteriálních buněk. Výsledek získaný pro všechno vám dává biomasu. -
Najděte suchou hmotu. Chcete-li znát suchou biomasu vzorku, umístěte vážicí misku do pece nastavené na 100 ° C na dobu 6 až 24 hodin, podle pokynů dodaných s vaším zařízením. Dávejte pozor, abyste tuto teplotu nepřekročili, abyste zabránili spálení bakterií. Pak vše zvážit a odečíst hmotnost zásobníku.
Metoda 3 Postupujte turbidimetrií
-
Připravte si vybavení. Budete potřebovat světelný zdroj a spektrofotometr, zařízení, které se nachází ve většině vědeckých laboratoří. Podívejte se na dodanou uživatelskou příručku, protože každý model má svou vlastní činnost. Tato metoda je jedním z nejčastěji používaných pro měření bakteriálního růstu, protože vyžaduje pouze levné a snadno použitelné nástroje. -
Přineste světlo do kultury. Zákal se používá k vyhodnocení obsahu kapaliny v částicích, je to množství k určení, zda je více či méně zakalená. Výsledek, který získáte z tohoto měření, bude uveden v NTU (nebo nefelometrické jednotky zákalu). Může být nezbytné provést kalibraci zařízení, aby bylo možné přesně změřit zákal vzorku. -
Dělejte si poznámky. Zákal je množství bakterií ve vzorku. Spektrofotometr vám také umožní znát propustnost roztoku (% T), jehož hodnota je nepřímo úměrná hodnotě zákalu. Potom porovnejte výsledky získané na různých vzorcích pro měření bakteriálního růstu.